含有保加利亚乳杆菌 DWT1 的益生菌配方在新冠肺炎患者中的应用
含有保加利亚乳杆菌 DWT1 的益生菌配方在新冠肺炎患者中的应用
Mariya Penevaa1, Ioannis Misopoulosb, Evgenia Barzashkac1, Tsvetan Lukanovc2, Tsetsa Doichinovac3, Anna Petkovad, Marieta Georgievae, Georgy Aleksandrova2, Pencho Tonchevc4
- a – MC Evrozdrave, 7 Rusaliiski prohod St., Sofia, Bulgaria
- b – Mika Nutri-Pharma , 18 Samuil St., Petrich, Bulgaria
- c – Georgi Stranski University Hospital, 8a Georgi Kochev Blvd., Pleven, Bulgaria
- d – University Hospital ” Anna”, 1 Dimitar Mollov St., Sofia, Bulgaria
- e – Medical University ” Dr. Paraskev Stoyanov” – Varna, 55 Marin Drinov St., Varna, Bulgaria
新冠肺炎的疫情影响了整个世界，并夺去了超过 600 万受害者的生命。因此，我们进行的临床研究所显示出的信息相关重要。本临床研究的目的是评估含有保加利亚乳杆菌 DWT1 和嗜热链球菌 DWT4 的益生菌配方 Laktera 对新冠肺炎患者细胞免疫力的影响。
本试验中，我们对患者进行了核酸检测、副诊血液、生化和免疫学检查、X光检查、肺部CT 和医疗咨询。研究的统计数据由 IBM SPSS 软件 23 版完成。
本临床试验是一项前瞻性、队列、随机、开放的试验。试验的对象是78名2020年因新冠肺炎住院的患者，随机分为两组：A 组 – 47 名患者除了普通治疗之外服用 Laktera 益生菌 （每日剂量为 15-45 克）作为多方面治疗的一部分，B 组 – 31 名病人仅接受普通治疗。两组患者在性别、年龄、伴发病的频率和类型方面的分布没有显著性差异。所有患者的治疗方案包括输液、服用维生素、退热药、皮质类固醇、抗凝剂、H2受体阻断药、抗生素组合以及氧气治疗。A 组患者的治疗方案包括使用含有保加利亚乳杆菌 DWT1 的益生菌作为附加的营养治疗。两组患者细胞免疫(活性)的研究结果的对比显示，A组患者中，NK 细胞值有显著性差异的增加, 从统计方面上有明显的提高，T 细胞毒性淋巴细胞标记物增加，以及辅助性T细胞标记物的减少/正常化。辅助性T细胞有产生细胞分裂素的功能，而数量增多的细胞分裂素导致细胞因子风景和死亡。B 组死亡的名患者入院时辅助性T细胞量增多，之后它急剧增加直到患者死亡。A组两名患者入院时辅助性T细胞量增多，随后恢复正常。A组患者的平均住院时间比B组患者短4天。A 组患者的死亡率为 0%，B 组的为 9.68%。2021 年，我们对 8 名年龄 25-38 岁、怀孕33-36 周因新冠肺炎住院的孕妇进行了临床观察。 肺部 CT 显示所有 8 名女性均患有肺炎。孕妇的治疗选择非常有限，因为许多治疗新冠肺炎的药物在怀孕期间是禁忌的。所有孕妇都服用了两种抗生素，接受了氧气治疗。 这些患者服用的抗凝剂的每日剂量取决于患者的D-二聚体值。所有患者都服用了每日剂量为 30 克的含有保加利亚乳杆菌 DWT1的益生菌配方、产前维生素和补充剂。以提高胎儿成熟度，一名患者在48小时内接受了皮质类固醇。所有孕妇的整体健康状况和副诊检查的指标在住院第3-4天就有好转。患有新冠肺炎的孕妇的住院治疗时间为28 天。孕妇通过剖腹产所生育的是活产，所有孕妇术后康复顺利，无并发症。所有新生儿均整体健康状况良好，核酸检测的结果均为阴性。
含有保加利亚乳杆菌 DWT1 的益生菌配方可调节患有新冠肺炎患者的细胞免疫——以上的益生菌配方增加 NK 细胞和 T 细胞毒性淋巴细胞的数量，并调节辅助性T细胞的数量。使用这种益生菌配方可以降低新冠肺炎患者的死亡率、缩短患者的住院时间、并减轻卫生系统的负担。 在患有新冠肺炎的孕妇中将益生菌配方作为新冠肺炎治疗方案的一部分，可成功控制病毒感染，也可以导致未感染新冠肺炎活产的无并发症生育。本临床研究的结果和益生菌配方受保加利亚专利保护，专利号为4294U 。以上的结果和益生菌配方开辟了应用保加利亚乳杆菌 DWT1 作为益生菌免疫疗法的新远景。
关键词:
Immunity; Lactobacillus Bulgaricus DWT1; Pregnancy; Probiotic; SARS-CoV-2
Bratislava-L.bulgaricus_Peneva_CN
保加利亚乳杆菌在临床中的应用
保加利亚乳杆菌在临床中的应用
由PAi和NISER联合举办的第三届关于压力、微生物和益生菌两年一次的会议和内部专题讨论会，2016年3月11-13日
Georgi Alexandrov1*, Maria Peneva2
1保加利亚索非亚军事医学院-
2保加利亚索非亚医疗中心
材料与方法：本研究针对625例不同疾病患者的临床治疗，对不同的患者使用了不同的菌株保加利亚乳杆菌的益生菌配方。保加利亚领土上的保加利亚乳杆菌全部重复进行繁殖。
结果和讨论：肝损害是酒精中毒情况下最主要的一种症状，因此它被用作慢性肝损伤的模型。本研究中，我们对32例酒精性疾病患者进行了双盲随机对照研究。其中17人服用了益生菌配方，包括日剂量为30g含保加利亚乳杆菌DMR 1和DMR 2的菌株(10亿CFU/g以上)，同时也能配合使用为期6个月的该益生菌配方与西利马林提取物(600 mg/24h)作为综合治疗方案的一部分。除此之外，补充营养疗法使酒精性疾病患者的ASAT值、ALAT值、GGTP值和超声图像的正常值均有了显着的提高，使得肝细胞功能得以恢复正常。其他78名酒精性疾病患者每日服用含保加利亚乳杆菌DWT1的益生菌食物和152名海洛因依赖者和208名病毒性肝炎患者每日服用相同剂量的保加利亚乳杆菌Lb4能够得到一致的结果。
对于德国一名年龄为28岁的诊断为失代偿性肝硬化且需要肝移植的患者，医生建议其服用日剂量为60g，含保加利亚乳杆菌DMR 1和DMR 2菌株的益生菌配方(10亿CFU/g以上)作为一种补充营养治疗的基本疗法，服用疗程为6个月。
我们建议德国一名年龄为28岁的诊断为失代偿性肝硬化且需要肝移植的患者每日服用60g含保加利亚乳杆菌DMR 1和DMR 2菌株的益生菌配方(10亿CFU/g以上)，服用疗程为6个月。这是作为该疾病的一种补充营养治疗的基本疗法。治疗一段时间后，该患者无须再进行肝移植手术，其病情已经得到好转。并且，她的血液和其他各项测试均显示正常，她的各种功能也逐渐得到了恢复。
关于益生菌在局部阴道的应用，我们对32例有阴道分泌物的女性患者进行了研究。我们建议其每日服用500mg含保加利亚乳杆菌DMR 1和DMR 2菌株的益生菌配方(10亿CFU/g以上)作为抗感染治疗的一部分。结果显示，阴道分泌物抗感染治疗后5天内服用益生菌能够显著提高乳杆菌科正常菌群的数量。此外，12例有阴道分泌物的女性患者每日服用含保加利亚乳杆菌DMR 1的益生菌配方和33例有阴道分泌物的女性患者每日服用相同剂量的含保加利亚乳杆菌Lb4的益生菌配方得出的结果是一致的。
结论：本研究结果表明，将保加利亚乳杆菌DMR 1、DMR 2和DWT 1菌株单独使用或与植物提取物和油联合使用的益生菌配方作为复杂治疗方案的一部分，可以显著提高肝功能和阴道菌群的恢复效果。
益生菌的有益作用主要由其亚种决定，因为各菌株表现出一定的显著特征。
同时，益生菌的有益作用也与给药剂量和给药周期成正比。
关于食物过敏患者的流行病学研究
关于食物过敏患者的流行病学研究
Peneva, MC „Evrozdrave-Bulgaria”，论文摘要摘录，索非亚，2016，p.27-29
在2009~2014年间，在与专科医师的合作下，我们对麦克列兹格拉夫的58例年龄在3~81岁之间的食物过敏患者进行了临床研究。在这58例患者中，6例为3~9岁儿童。其中女性29例，年龄为22~81岁，男性23例，年龄为24~71岁。所有患者均有不同的过敏反应表现。在其中一些患者中，我们观察到了一些典型的过敏症状，包含泪囊炎、鼻炎、各种皮疹、皮肤瘙痒以及腹泻等。另外，我们还在一些患者中，观察到了新发现的食物过敏症状，如脱发、头皮屑、牙周疾病以及催乳素水平升高等。所有患者均采用ELISA法对19组食物过敏原进行免疫测定。免疫调节法是用来测定血清中某些食物过敏原特异性抗体的数量。所有的患者均接受了19组食物蛋白质的过敏试验。结果如图1所示，所有患者对一种以上的食物过敏原都有过敏反应。
在所有的食物中，患者对花生、海鲜、草莓、蛋白、可可和牛奶过敏的比例是很高的。只有一名患者是对羊奶过敏，这很可能是因为山羊奶的成分和营养功能与母乳最为接近。对牛奶蛋白过敏和体内乳糖酶分泌不足之间应存在差异，该酶能够分解乳糖(牛奶糖)。在确定食物过敏类型之后，我们建议所有患者停止进食含有食物过敏原的食物。同时，根据过敏的严重程度，我们建议患者每日服用1-2片克拉甲素进行抗过敏治疗，每日服用剂量为15g的Laktera Nature，同时配合每日服用2粒Laktera玫瑰油胶囊进行益生菌治疗。对牛乳蛋白过敏患者的益生菌营养治疗主要是每日服用15g山羊乳益生菌Laktera Allergy free，同时配合每日服用2粒Laktera Allergy free rose+。保加利亚乳酸菌复合保加利亚玫瑰油的益生菌显着地降低了患者的过敏症状和身体的过敏倾向。此外，保加利亚乳杆菌还能够改善乳糖消化，但这与过敏过程无关，并根据欧洲联盟第432/2012条例批准了健康声明。根据过敏的严重程度，患者食物过敏的临床症状已经消退了大概2到6周。我们叮嘱患者，他们必须小心选择和购买食物，检查标签上有关食物成分及食物中所含过敏原的说明。同时，我们也建议患者在公共餐厅就餐时，也要时刻注意避免选择跟自身条件相关的过敏原。
这项研究的结果表明，过敏性疾病在过去十年中成上升趋势，食物过敏现在已被公认为是一种社会重大疾病。显然，食物过敏在劳动适龄人口中广泛传播，这使得他们需要专门的医疗保健。同时，他们还需要由医疗专家、卫生管理人员和食品安全专家对其进行复杂的一系列治疗。食物过敏对人们造成巨大的社会、经济和心理损害。因此，食物过敏患者应当关注自身的健康、保持抗风险行为和健康的生活方式，积极和有针对性地在食用前对产品中的过敏原进行排查。
关于益生菌的抗癌活性的实验和临床研究
关于益生菌的抗癌活性的实验和临床研究
2015年在希腊塞萨洛尼基召开的第六届东南欧化疗和感染会议
Georgi Alexandrov1*, Kaloyan Georgiev2, Marieta Georgieva2, Ivan Iliev3, Maria Peneva4
1保加利亚索非亚军事医学院
2保加利亚瓦尔纳医科大学药学院临床前和临床科学系、部门药理学和毒理学系
3保加利亚索非亚保加利亚科学院博物馆实验形态学、病理学和人类学研究所
4保加利亚索非亚“Evrozdrave”医疗中心
目的：本研究旨在研究益生菌Laktera Nature®的不同成分对结直肠癌的抗癌作用，并探讨益生菌配方对结直肠癌患者的营养治疗作用。
材料和方法：我们采用了四种类型的细胞系，分别是3T3、BJ、HT-29H和MB-231。MTT染料还原法用来检测细胞毒性。在第24小时测定了被测细胞系的直接细胞毒性，并在第72小时测定了其抗增殖活性。另外，我们采用了四种Laktera Nature®不同样品：样品1(原益生菌配方含保加利亚乳杆菌DWT1、嗜热链球菌DWT4和21种乳酸氨基酸的活细胞)，样品2(只含有益生菌菌株而不含氨基酸)，样品3(只含有21种乳酸氨基酸而不含益生菌株)和样品4（最初的益生菌配方已经通过了γ-灭菌10Gy，其中益生菌菌株被杀死，只留下细胞壁）。本文对接受化疗和放射治疗的13例结直肠癌手术患者进行了临床研究。半数患者每日服用15克的Laktera Nature®(样品1)作为营养疗法。
结果和讨论：这四个样品结果显示，在24小时时被测细胞株的直接细胞毒性可以忽略不计。样品3和4表现出一种轻微的浓度和时间依赖性的细胞毒性效应。有趣的是，样品2(只含有益生菌株)对肿瘤生长(如MDA-mb-231)没有达到预期的抑制作用，而相反，它甚至促进了肿瘤的生长。其中，样品1(原益生菌配方含保加利亚乳杆菌DWT1、嗜热链球菌DWT4和21种乳酸氨基酸的活细胞)对HT-29和MDA-MB-231细胞有明显的抑制作用，在第72小时测量的IC50值分别为711,69 ± 82,1mcg/ml和934,21 ± 43,5 mcg/ml。
平行临床试验结果表明，用原益生菌配方Laktera Nature®进行营养治疗能够使患者参与化疗和放射治疗的全部疗程，并减少化疗和放射治疗带来的副作用。
结论：原益生菌配方LakteraNature®能够抑制癌细胞株HT-29和MD-MB-231的生长。LakteraNature®营养疗法不仅能够提高生活质量，还能提高结直肠癌患者的生存率。
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| 病人指标 | I 组 (服用 Laktera Nature®者) | II 组 (未服用 Laktera Nature®者) |
| 哮喘–阿尼综合征 | 29% | 66% |
| 消耗性综合征 | 14% | 33% |
| 恶心&作呕 | 29% | 83% |
| 病毒和其他感染的频繁发病率 | 29% | 50% |
| 因副作用或并发症而导致治疗方案中断或延迟 | 14% | 50% |
| 死亡率 | 14% | 33% |
巴尔干地区益生菌的新发现
2014年希腊雅典召开的IPA 世界大会
Petrov1, G. Aleksandrov1 and M. Peneva2
1 MMA, 3 Sv. Georgy Sofiiski Str., 1606 Sofia, Bulgaria;
2 MC Evrozdrave, 7 Rusaliiski prohod, 1407 Sofia, Bulgaria; office@daflorn.com
巴尔干半岛的乳酸发酵历史已经有好几个世纪了，这可追溯到从酸奶、家畜、婴儿粪便和植物中分离出的乳酸微生物。本研究旨在发掘有益乳酸菌株的其他来源。我们从保加利亚泉水中分离出了8种天然菌株，包括保加利亚乳杆菌、嗜热乳杆菌、乳酸杆菌和嗜热链球菌等。这些菌株能够在不断变化的天气条件下，在流动的泉水中得以生存和繁殖。这些菌株在发酵、冷冻干燥升华和24°C贮藏等环境中能够存活3年。再水化后，它们还能够在贯穿整个胃肠道中存活下来，并能够附着在结肠中。水源益生菌菌株对病原微生物有很好的抑菌作用，并减少了术后并发症。含有这些菌株和天然氨基酸的益生菌日常食品明显改善了蛋白质的吸收，克服了术后低蛋白血症和失调性蛋白血症。本研究表明，从水中分离出的保加利亚乳杆菌等乳酸微生物是可行的，对人体健康有一定的促进作用。此外，从泉水中分离出的益生菌乳酸菌株针对乳酸菌来源的公认意见提出了的修正问题。
美国达福能有限公司专利 专利编号达福能有限公司欧洲专利申请 专利编号
美国达福能有限公司专利 专利编号：US 9131708 B2 专利日期：2015年9月15日 奶制品中的益生菌
达福能有限公司欧洲专利申请 专利编号：EP 3 172 973 A1 颁布日期：2017年5月31日 益生菌配方、制备工艺及应用
美国达福能有限公司专利 专利编号
本发明涉及含有益生菌的成分以及制作和使用含有这些微生物的益生菌成分的方法。具体而言，本发明涉及益生菌乳酸微生物的组合，包括新发现的微生物菌株及其在饮食产品中的应用。这些微生物经培养后生成一种保护层，可增强本发明的成分和产品的自我稳定性。这些分离出的微生物包括保加利亚乳杆菌、希腊乳杆菌、乳酸杆菌、嗜热链球菌等新菌株。
根据本项美国专利，所有产品都含有从保加利亚的纯净泉水中分离出来的原产益生菌菌株。所有产品均已获得欧盟第432/2012号条例批准的健康声明：采用活的益生菌来培养保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌，能够改善乳糖消化困难个体的乳糖消化情况。
达福能有限公司欧洲专利申请 专利编号
本发明涉及从罗德普山的一种传统奶制品中分离出的益生菌配方，涉及益生菌配方的制备过程及其作为肝功能和结构受损者的膳食食品，以及控制食物过敏症状和恢复妇女正常阴道乳酸菌群。微生物的益生协同作用包括新发现的保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌。这种益生菌协同作用用于标准化巴氏杀菌山羊奶的发酵以制备益生菌配方，冷冻干燥后在室温至24°C保存24个月，包含浓度为1.1×109 CFU/g至1.6×109 CFU/g益生菌协作的活细胞。
根据欧盟专利，所有产品都含有独特的羊奶益生菌和原始菌株。并且，所有产品均已根据欧盟第432/2012号条例批准了健康声明：用活的益生菌来培养保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌能够改善乳糖消化困难个体的乳糖消化。